近年來,隨著心臟電生理研究的不斷深入和細胞分子生物學(xué)在心血管研究領(lǐng)域的不斷普及,成年大小鼠心肌細胞已廣泛用于成熟心肌細胞離子通道、蛋白免疫化學(xué)、心肌病及心肌梗塞等模型的實驗研究中。成熟心肌細胞不僅在結(jié)構(gòu)和功能上更接近在體細胞,并且成熟心肌細胞的體外培養(yǎng)模型可以排除成纖維細胞對實驗結(jié)果的干擾。
心臟由心肌細胞和間質(zhì)細胞組成。心肌細胞占心臟總體積的75%,但細胞數(shù)僅占心臟細胞總數(shù)的1/3。出生后心肌細胞喪失增值能力,是高度分化的終末細胞,主司收縮功能。間質(zhì)細胞由成纖維細胞、血管平滑肌細胞、神經(jīng)細胞及巨噬細胞等組成。成纖維細胞占間質(zhì)細胞90%以上,成纖維細胞具有分泌功能,合成和分泌生物活性物質(zhì),調(diào)節(jié)自身膠原的產(chǎn)生及周圍心肌細胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)和生理功能。
心肌細胞按生理功能分為兩類:一類為工作細胞,包括心房肌及心室肌,胞漿內(nèi)含有大量肌原纖維,因而具有收縮功能,主要起機械收縮作用。除此以外,還具有興奮性、傳導(dǎo)性而無自律性。另一類為特殊分化的心肌細胞,包括分布在竇房結(jié)、房間束與結(jié)間束、房室交界、房室束和普肯耶纖維中的一些特殊分化的心肌細胞,胞漿中沒有或很少有肌原纖維,因而無收縮功能,主要具有自律性,有自動產(chǎn)生節(jié)律的能力,同時具有興奮性、傳導(dǎo)性。無論工作細胞還是自律細胞,其電生理特性都與細胞上的離子通道活動有關(guān),跨膜離子流決定靜息膜電位和動作電位的形成。
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1969年Kono和Powell等先后應(yīng)用酶解法對成年大鼠心肌細胞進行分離,1977年Jacobson成功進行了成年大鼠心肌細胞的培養(yǎng)。龍西林等于1991年在國內(nèi)分離出成年大鼠心肌細胞。成年大小鼠心肌細胞的分離與培養(yǎng)難度較大,酶解法用于成年鼠心肌細胞的分離已有近五十年的歷史,但至今仍無統(tǒng)一方法可循。目前對于成年鼠心肌細胞的研究主要集中于大鼠心肌細胞,小鼠心肌細胞的分離與培養(yǎng)難度更高。隨著轉(zhuǎn)基因技術(shù)的興起,以及siRNA與microRNA等方面調(diào)控研究的不斷深入,對于體外分離的成年鼠心肌細胞的活性和成活率有了更高要求,這也對成年大小鼠心肌細胞分離和培養(yǎng)提出更高要求。齊氏生物在總結(jié)前人方法的基礎(chǔ)上,應(yīng)用改良的Langendolf方法進行心臟多次灌流,分離得到的大小鼠心肌細胞純度高,成活率高,可用于心血管疾病發(fā)生發(fā)展研究以及心血管藥物的研究及多種生理生化實驗的要求。
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